磷酸化是細(xì)胞內(nèi)最常見(jiàn)和最重要的蛋白質(zhì)翻譯后修飾之一。蛋白質(zhì)的磷酸化和去磷酸化作為一種“分子開(kāi)關(guān)”，通過(guò)影響蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、定位和功能，在細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)錄翻譯、代謝和發(fā)育等生命過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。在真核細(xì)胞中，大約 1/3 的蛋白質(zhì)會(huì)被磷酸化。
盡管磷酸化蛋白的數(shù)目相對(duì)較多，但磷酸化多肽在總酶切多肽中的占比并不高，據(jù)推測(cè)可能不足 5%，大量非磷酸化蛋白的存在會(huì)對(duì)磷酸化蛋白的鑒定造成一定的挑戰(zhàn)。近年來(lái)不斷有各種磷酸化富集方法的報(bào)道，使得磷酸化蛋白質(zhì)和磷酸化位點(diǎn)的鑒定數(shù)目有了大幅度的提高，目前最常用的是親和色譜法，包括IMAC,Fe-NTA和TiO2等。
青蓮百奧推出了基于Ti-IMAC材料的磷酸化肽段富集試劑盒，利用金屬離子Ti與磷酸基團(tuán)之間的特異性相互作用富集磷酸化肽段，富集能力是常規(guī)固定化金屬離子親和色譜法（Fe3+-IMAC）的3倍以上，與TiO2相比可以提高約30%，富集特異性可達(dá)95% [1]。
青蓮百奧磷酸化肽段富集試劑盒——PEB2
測(cè)試使用100ug Hela細(xì)胞肽段，在DIA的數(shù)據(jù)采集模式下使用QE-HFX進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè)，檢測(cè)梯度60min。最終檢測(cè)到24,000+磷酸化位點(diǎn)，22,000+磷酸化肽段和3,600+磷酸化蛋白。其中，多位點(diǎn)磷酸化蛋白數(shù)量占比近40%。
高效的富集能力：26000+位點(diǎn)
穩(wěn)定的富集能力：富集效率維持在90%以上
多位點(diǎn)磷酸化肽比例高
相比于常規(guī)的實(shí)驗(yàn)流程，磷酸化肽段富集試劑盒PEB可以良好適配自動(dòng)化流程。結(jié)合青蓮百奧最新發(fā)布的智慧實(shí)驗(yàn)室——Magic Show，覆蓋從蛋白質(zhì)提取、質(zhì)量控制、低豐度富集、還原烷基化、酶解脫鹽到翻譯后修飾富集的樣本前處理全流程。實(shí)現(xiàn)磷酸化肽段的高效、自動(dòng)化富集，進(jìn)一步降低人為誤差，縮短實(shí)驗(yàn)流程！
青蓮百奧修飾蛋白組學(xué)產(chǎn)品線升級(jí)，不僅精心打磨了經(jīng)典修飾產(chǎn)品線（如磷酸化、糖基化、泛素化等），同時(shí)開(kāi)拓了一系列新型修飾產(chǎn)品線（如乳酸化、酰化修飾、氧化還原等）。現(xiàn)憑借先進(jìn)的高分辨率、高靈敏度質(zhì)譜技術(shù)，積累了豐富的修飾組學(xué)研究經(jīng)驗(yàn)，提供深入的生物信息學(xué)分析報(bào)告，為科研工作的深入探索和成果的有效轉(zhuǎn)化提供強(qiáng)有力的支持。歡迎咨詢！
參考文獻(xiàn)：
Yao Y, Dong J, Dong M, et al. An immobilized titanium (IV) ion affinity chromatography adsorbent for solid phase extraction of phosphopeptides for phosphoproteome analysis. J Chromatogr A. 2017;1498:22-28. doi:10.1016/j.chroma.2017.03.026
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