作為連接基礎(chǔ)科學(xué)與臨床應(yīng)用的橋梁，血液分析為科研人們提供了探索疾病機(jī)制、監(jiān)測(cè)治療效果的窗口。然而，血液樣本的采集、處理和儲(chǔ)存過(guò)程中的微小差異，都可能導(dǎo)致研究結(jié)果的巨大偏差。為了確保研究的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性，我們有必要深入理解并掌握血液樣本的正確處理方法。在這里，小編將細(xì)致展開(kāi)血液樣本的采集和處理流程，包括但不限于采血管的選擇、抗凝劑的使用、樣本的分離、儲(chǔ)存條件等關(guān)鍵步驟。
將血液采集到含有抗凝劑的采血管中所形成的混合物，包括血細(xì)胞（如紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板等）和血漿的所有成分。
在采集血液樣本時(shí)，科研人員必須明確區(qū)分血漿和血清。兩者均為血液的液體部分，但在成分和制備方法上存在顯著差異。
定義：全血經(jīng)抗凝處理后，通過(guò)離心獲得的不含細(xì)胞成分的淡黃色透明液體。
成分：主要包括水（約90%）、蛋白質(zhì)（如白蛋白、免疫球蛋白、纖維蛋白原等）、電解質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素和廢物。
特點(diǎn)：含有纖維蛋白原和凝血因子。
定義：全血凝固后，離心分離出來(lái)的淡黃色透明液體。
成分：與血漿成分相似，但不含纖維蛋白原和凝血因子。
特點(diǎn)：纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，形成血凝塊，血清則為血凝塊形成后剩余的液體部分。
根據(jù)試驗(yàn)需求選擇采血管類(lèi)型：
血液采集需通過(guò)倫理審查。采樣前準(zhǔn)備好采血所需材料和設(shè)備，并確保所有材料和設(shè)備都是無(wú)菌，可以隨時(shí)使用。
使用血清管采集靜脈血樣本，采集后立即輕輕顛倒搖勻5-8次，使促凝劑和血樣充分混勻，促進(jìn)血液凝固。保持標(biāo)本管垂直、管口向上放置。樣本于室溫(22-25℃)中靜置30-60 min，待血液完全凝固。
使用含有抗凝劑的血漿收集管采集靜脈樣本，采集后立即輕輕顛倒搖勻5-8次，確?？鼓齽┖脱獦映浞只靹?。保持標(biāo)本管垂直、管口向上放置。
注：收集的全血需盡快處理成血清/血漿；若不能及時(shí)處理，放置于2℃-6℃保存，保存時(shí)間不易超過(guò)35d。
血液采集時(shí)，應(yīng)避免溶血現(xiàn)象，采集時(shí)應(yīng)注意：靜脈采血時(shí)，抽血速度不易過(guò)快；一次性采血量不宜過(guò)少；采集的全血不宜激烈振蕩；離心轉(zhuǎn)速不宜過(guò)大。
血清樣本在室溫靜置30-60min后可離心分離，血漿于收集后可立即離心分離出血漿。
離心條件：在1200g下，4℃下離心10min，小心收集上層淡黃色透明溶液，避免擾動(dòng)紅細(xì)胞和白細(xì)胞層。
將收集的血漿/血清按需分裝，在-20℃或-80℃下儲(chǔ)存。
儲(chǔ)存溫度：2℃-8℃；保存期：<48h
全血不能凍融；
已分離的血清/血漿，在室溫條件保存不宜超過(guò)8h；如果試驗(yàn)在8h內(nèi)不能完成，血清/血漿應(yīng)轉(zhuǎn)入2℃-8℃保存。
溫度條件：
短期儲(chǔ)存：若存放于4℃，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。
長(zhǎng)期儲(chǔ)存：血清/血漿應(yīng)保存在-20℃或-80℃溫度下。長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃可能導(dǎo)致血清中的各種蛋白和脂蛋白聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。
避光儲(chǔ)存：血清/血漿應(yīng)避免暴露在陽(yáng)光直接照射下，以防止光照對(duì)樣品造成不良影響。
冷凍狀態(tài)解凍時(shí)，應(yīng)先將血清置于2-8℃冰箱融解，然后在室溫下全融。注意解凍過(guò)程中避免直接由-20℃或-80℃直接至室溫下解凍，因?yàn)闇囟雀淖兲笕菀自斐傻鞍踪|(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。同時(shí)，應(yīng)避免反復(fù)凍融，因?yàn)榉磸?fù)凍融會(huì)破壞血清中的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。
溫度條件：
短期儲(chǔ)存：若存放于2-8℃條件下，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月，以避免代謝物發(fā)生變化。
長(zhǎng)期儲(chǔ)存：血清/血漿應(yīng)保存在-80℃的低溫條件下，以維持代謝物的穩(wěn)定性。使用-80℃冰箱或液氮罐等設(shè)備可以確保樣本在長(zhǎng)時(shí)間的儲(chǔ)存中保持穩(wěn)定。
避光儲(chǔ)存：血清/血漿應(yīng)避免暴露在陽(yáng)光直接照射下，以防止光照對(duì)樣本造成不良影響。
從冷凍狀態(tài)解凍時(shí)，應(yīng)先將血清/血漿置于2-8℃冰箱或冰上緩慢進(jìn)行。注意解凍過(guò)程中避免直接由-80℃直接至室溫下解凍，因?yàn)闇囟雀淖兲笕菀自斐纱x物發(fā)生變化。
參考文獻(xiàn)：
[1]Vignoli, Alessia, et al. "Serum or plasma (and which plasma), that is the question." Journal of proteome research 21.4 (2022): 1061-1072.
[2]Sotelo-Orozco, Jennie, et al. "A comparison of serum and plasma blood collection tubes for the integration of epidemiological and metabolomics data." Frontiers in Molecular Biosciences 8 (2021): 682134.
[3]Lima-Oliveira G, Monneret D, Guerber F, et al. Sample management for clinical biochemistry assays: Are serum and plasma interchangeable specimens?[J]. Critical reviews in clinical laboratory sciences, 2018, 55(7): 480-500.
[4]Plebani M, Banfi G, Bernardini S, et al. Serum or plasma? An old question looking for new answers[J]. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (CCLM), 2020, 58(2): 178-187.
[5]Liu X, Hoene M, Wang X, et al. Serum or plasma, what is the difference? Investigations to facilitate the sample material selection decision making process for metabolomics studies and beyond[J]. Analytica chimica acta, 2018, 1037: 293-300.
[6]Hoffman, Ronald, et al. Hematology: basic principles and practice. Elsevier Health Sciences, 2013.
[7]Lobb R J, Becker M, Wen Wen S, et al. Optimized exosome isolation protocol for cell culture supernatant and human plasma[J]. Journal of extracellular vesicles, 2015, 4(1): 27031.
[8]《臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的收集與處理》.【中國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)】WS/T 225-2002.
[9]血液成分的制備使用和質(zhì)量保證指南.20版[M].胡偉，江廣志，付涌水，等譯.北京：人民衛(wèi)生出版社，2021..
[10]高曉云,王新華.新鮮冰凍血漿融化后不同保存時(shí)間及溫度對(duì)凝血功能的影響[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志.2017,25(3):911-915.
@2024北京青蓮百奧生物科技有限公司 京ICP備17052224號(hào)
