?前我公司可以接受細胞總數(shù)?于200個的樣本。樣本類型只承接細胞,需要客戶將組織酶解成細胞后送樣。
糖基化修飾主要發(fā)生在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體。主要過程是將糖基在糖基轉(zhuǎn)移酶作?下將糖鏈轉(zhuǎn)移至蛋白質(zhì) ,和蛋白質(zhì)上的氨基酸殘基形成糖苷鍵。修飾位點:O-糖基化修飾位點:S、T、K;N-糖
基化修飾位點:N。
富集方法:利用HILIC富集。
蛋白質(zhì)甲基化修飾(Methylation)是表觀遺傳學(xué)的重要研究內(nèi)容之?。甲基化多發(fā)?在轉(zhuǎn)錄因?和核蛋?質(zhì)上,也有少量胞質(zhì)蛋白會發(fā)?。修飾發(fā)?位點:K/R。精氨酸甲基化參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控,介導(dǎo)DNA損傷修復(fù)。賴氨酸甲基化可調(diào)控組蛋?功能,參與基因轉(zhuǎn)錄的表現(xiàn)調(diào)控。
利?CST公司針對不同甲基化位點和修飾形式的基序抗體對甲基化肽段富集后,再?LC-MS/MS分析,實現(xiàn)?規(guī)模甲基化蛋?質(zhì)定性定量分析。
蛋?質(zhì)酰基化是?種特殊的蛋?翻譯后修飾,其修飾基團的供體由體內(nèi)代謝途徑的中間產(chǎn)物,如乙?;揎椀囊阴;且阴]o酶A提供。
修飾發(fā)?位點:K。
樣品經(jīng)Trypsin酶切,本公司采?商品化試劑盒乙?;禺愋钥贵w進行乙酰化肽段的富集。
泛素化是指泛素(?類低分?量的蛋?質(zhì))分?在?系列特殊的酶作用下,將細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)分類,從中選出靶蛋?分?,并對靶蛋?進?特異性修飾的過程。發(fā)?位點:K。
泛素化參與了細胞周期、增殖、凋亡、分化、轉(zhuǎn)移、基因表達、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、信號傳遞、損傷修復(fù)、炎癥免疫等?乎?切?命活動的調(diào)控,與腫瘤、心血管等疾病的發(fā)病密切相關(guān)。
??氨酰賴氨酸抗體富集:能夠特異性識別Gly-Gly-ε-Lys結(jié)構(gòu)域的抗體,?于富集泛素化信號肽,?泛?于泛素化修飾組學(xué)分析。
磷酸化是?種常?的可逆的翻譯后修飾,在細胞信號傳導(dǎo)等眾多的?物過程中發(fā)揮調(diào)節(jié)作?,修飾常常發(fā)?在S、T、Y位點上;研究信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細胞周期、??發(fā)育以及癌癥機理等?向會?到;富集方法:TiO2富集,固相金屬親和色譜IMAC富集,pY-1000基序抗體富集我們公司采?具有順磁特性的孔瓊脂糖Tio2磁珠作為?具,對模型樣品和復(fù)雜樣品中的磷酸肽進?富集。
判斷修飾位點的?作都是由軟件搜庫時?次性完成的,搜結(jié)果中會給出修飾位點。
原理?般如下,質(zhì)譜打到肽段,判斷某個地?是否發(fā)?磷酸化修飾,就是看某個肽段是否多了80Da的分?量,?般發(fā)?磷酸化是STY三個點,如果?個肽段例如VAMEKKTK,整個肽段就是多了80Da,不同碎?離?的分?量變化也能與這個位點相對應(yīng),所以就會判定磷酸化修飾就發(fā)?在了T這個位點上 ,因此判定這個位點發(fā)?了磷酸化修飾.
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